DTH是Delayed Type Hypersersitivity的缩写,意为延迟型超敏反应,也称为IV型超敏反应。因这种超敏反应一般需要2-3天才能形成,因此得名。那么一个超敏反应与PCV2免疫效果有什么关系呢?我们的第一反应可能是“似乎有点或者根本没关系”。但是实际上,两者之间有非常有价值的关联,这也是我们这篇文章要解释的重点。
图1. 抗原皮内注射
其实DTH测试对于兽医工作者是非常熟悉的一种检测,因为这种检测方法通常用来诊断肺结核。当动物曾接触过结核菌素抗原,再次接触时会引发超敏反应。皮下接种失活的结核杆菌或者该菌纯化的蛋白部分可以在几个小时后在接种部位引发超敏反应,特点是皮肤增厚、水肿、红斑和硬结。这个测试是普遍知道的一个测试,关联的是一个细胞介导的免疫过程,这种测试常用来检测动物是否感染以及在净化过程中发挥作用。
那么,这个测试怎么会对PCV2免疫监控起到作用呢?其实很简单,猪圆环病毒II型(PCV2)本身是一种病毒,是一种细胞内病原,因此它可以引起适应性的细胞介导的免疫反应。实际上,在正常情况下,PCV2免疫所起的作用就是在动物体内引起体液和细胞免疫来对抗病毒。
图2. 腹部皮下接种24小时之后的典型反应(红斑)
那么接下来的问题就是:我们怎样实施DHT才能起到对PCV2免疫监控的作用?其实也非常简单,我们只需要将PCV2抗原皮下接种到一头我们有怀疑的猪上(比如那些我们希望知道是否漏免,疫苗是否合格,猪只是否被感染等),但要选择一个恰当的日期,与免疫时间形成一个时间间隔。一般免疫PCV2疫苗是在仔猪3-4周龄,我们至少要间隔3周才能进行这项测试。由于这种测试本身也具有比较好的保护效果(虽然程度较小),因此我们建议在7-9周龄时进行这项测试,也就是在免疫之后4-6周。
测试结果在24小时之后就可以获得,然后可以对结果进行定性(阳性/阴性)或定量(反应区的直径)读取。造成的反应(图2),红斑或硬结、有无水肿等,取决于所接种部位的皮肤和集中所用的仪器。对7-10周龄的仔猪进行接种最好选择小猪的腹部皮肤,最后一个和倒数第二个乳头之间。不需要注射镇定剂,因为接种的操作过程快速、安全,对小猪无害。这项测试的非常大的一个优点是在猪场里面就可以完成,而不需要进行实验室诊断。接种抗原一般使用胰岛素注射器就可以,当然也有别的替代品。
当对结果进行解读的时候,我们一定要记住:
- 这项测试的灵敏度在80%-85%左右。即在一组10-15头的猪中正常会有2-3头不表现反应,如果高于这个数就意味着可能这组动物没有被免疫。
- 如果没有出现反应,并不代表这头动物不被保护。因为我们上面说过,这种反应检测的是细胞免疫。但是疫苗的保护作用不仅仅靠细胞免疫实现,还依靠体液免疫(中和抗体)。
这个测试在一些情况下非常有用,比如说对一个育肥场在进仔猪的时候,想要知道这些仔猪是否已经免疫以及免疫的质量怎么样,就可以通过这种方法来验证。