临床案例: 一猪场爆发呼吸与繁殖疾病

猪场描述

2013年2月和10月，一自繁自养猪场（波兰瓦尔米亚）两次爆发呼吸与繁殖疾病。该猪场母猪存栏400头，母猪品种很多。每批次包含55只动物。仔猪在4周龄时断奶，断奶后进入30米远的保育舍。分娩舍和保育舍实施严格的全进全出制。每三个月猪场都会从供应商购买40只后备母猪，这批后备母猪为PRRSV阴性。后备母猪进场前免疫两次流感疫苗。育肥舍距离母猪舍和保育舍8 km，仔猪10周龄时进入育肥舍。

仔猪免疫疫苗包括猪肺炎支原体、胸膜肺炎放线杆菌和PCV2疫苗。母猪免疫细小病毒、猪丹毒、大肠杆菌和胸膜肺炎放线杆菌疫苗。

猪场生物安全水平很低。母猪和断奶仔猪由同一批工人饲养。育肥舍工人禁止进入母猪和断奶仔猪舍。距离母猪舍500米有一个屠宰场。

繁殖与呼吸问题

2013年2月我们访问了猪场。在分娩舍，有几窝仔猪很弱小。许多仔猪皮肤发白或者发黄。有时一窝中所有仔猪都是死胎或木乃伊胎。在保育舍，可以看到有些仔猪表现呼吸困难、咳嗽等呼吸症状。剖检和实验室诊断表明仔猪感染了胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、钩端螺旋体、猪痢疾短螺旋体。

在育肥舍，可见慢性咳嗽和呼吸困难，病猪对抗生素治疗无效，死亡率是8%。

从临床症状来看，怀疑病因为PRRSV 。因此我们利用ELISA 检测了哺乳仔猪、6和9周龄断奶仔猪和12、15、18 、21 周龄育肥猪PRRSV 血清转阳。每个年龄组采样8只动物。PRRSV 血清转阳在所有年龄组均检测到，表明猪群感染了这个病毒（表1.1）。

表1.1. 利用ELISA 检测PRRSV抗体

临床症状和血清学结果表明母猪群也感染了PRRSV 。于是猪场决定对所有母猪免疫PRRSV 弱毒活疫苗。此外，后备母猪在进入母猪群之前60天以及仔猪10日龄时均免疫PRRSV 弱毒活疫苗。

分娩舍和保育舍猪群的健康状况在随后几个月逐渐改善。但是，对2013年4月末流产的胎儿进行PCR检测，发现PRRSV 为阳性，表明病毒仍然在猪群流行。

在2013年6月，停止了对仔猪的免疫，但是后备母猪免疫继续。

2013年9月中旬，利用ELISA检测了14只7-8 周龄断奶仔猪、6只12周龄育肥猪的PRRSV 抗体。所有被检断奶仔猪和大部分育肥猪PRRSV 抗体检测为阴性，仅有一只育肥猪为阳性（表1.2）。这强有力地表明母猪群无PRRSV 流行，产下的仔猪为病毒阴性，保育猪似乎也无PRRSV感染。一只育肥猪PRRSV为阳性，表明PRRSV 并未完全从猪群中根除。

表1.2. 利用ELISA 检测PRRSV抗体

呼吸与繁殖障碍再次爆发

2013年9月末，育肥猪表现严重的咳嗽症状。对18份母猪和育肥猪血清样品中流感病毒抗体血清转阳进行了检测。还利用PCR检测了咳嗽育肥猪鼻拭子中的流感病毒。所有检测结果均为阴性。

截止到2013年10月末，保育舍猪群也发生了严重咳嗽，发烧超过40℃，食欲不振。2-3天后，特定年龄组的所有动物都表现这些症状。使用退烧药和强力霉素治疗病猪。断奶仔猪死亡率为3%。与过去发病情况不同的是，我们还发现了副猪嗜血杆菌病（格拉泽氏病）。

一周后，母猪开始发烧和咳嗽，两只母猪和一只公猪随后死亡，三只母猪流产。一般来讲，发烧仅仅持续3天，但是这些母猪症状似乎传播到整群动物，病情持续了3周。

截止到2013年11月和12月末，育肥猪也开始发烧。日平均增重从830g降低到760g。 饲料转化率增加到3.2。这一时期育肥猪死亡率为5%。

表2. 2013年8月和2014年3月之间死胎和木乃伊胎比例

自从母猪出现发烧和咳嗽后，繁殖性能开始下降（表2.）。死胎率从8、9月的5.5%增加到10月7.38 %，11月和12月分别为 6.33%和7%。此外，木乃伊胎比例从10月1%增加到12月2.77%。仔猪八字腿比例也增加。从2014年2月开始，除了木乃伊胎比例外，其它繁殖指标开始改善，呼吸症状也消失。

由于这次爆发的呼吸与繁殖疾病与2013年2月遇到问题具有相似性，因此怀疑是PRRSV 造成了繁殖障碍。在2014年2月初，从1、4 和7 周龄仔猪各采集8份血清，利用ELISA检测PRRSV 抗体。1周龄仔猪的8份样品中，有6份检测到特异性抗体，其它两个年龄组各有一只猪为阳性（表1.3）。虽然这些样品未做PRRSV PCR检测，但是血清学结果表明母猪和断奶仔猪无PRRSV感染。

2014年2月末，利用ELISA 检测了8周龄和24周龄育肥猪中PRRSV 抗体，其中7份样品为阳性（表1.3.）。由于它们是在仔猪PRRSV弱毒活疫苗免疫方案停止后出生的，因此这个结果表明育肥猪群中流行PRRSV 。

表1.3. 利用ELISA 检测PRRSV抗体

此外，使用ELISA 检测了上述所有血清样品中的流感病毒抗体，检测结果为阳性。这表明流感病毒在2013年9月之后感染猪群的，因为在这之前血抑试验和PCR都表明流感病毒为阴性。

2014年3月初，分别采集了断奶前死亡的3只仔猪的肺脏样本、7周龄断奶仔猪和10、13、16、19 和 24 周龄育肥猪的唾液样本。对每个年龄组的两栏猪采样。利用PCR检测仔猪肺部以及7、16 和19周龄猪的唾液中流感病毒（表3）。

利用PCR检测了上述样品中PRRSV，PRRSV从10周龄育肥猪两份唾液样品中一份检测到，同一猪栏内猪的血清样品集中后也检测到PRRSV。2周之后，同样样品进行ELISA 检测结果均为阳性（表3）。

表3. 2014年3月PCR检测血清和唾液PRRSV和肺脏和唾液流感病毒）。血清样品混合在一起（每一猪栏一份）提取RNA 。阳性1/2指两份样品中一份PCR为阳性。

确诊

2013年10月-2014年2月期间发生的繁殖障碍与PRRSV无关。2013年2月诊断出的PRRS通过给母猪和仔猪大面积免疫弱毒活疫苗而得到成功控制。后备母猪驯化是成功的关键，尽管PRRS已从母猪群和保育猪中完全根除，但是病毒仍然存在。这些因素不足以根除猪群的PRRSV。因为育肥猪舍采取的是循环进出制度（非全进全出制），因此病毒持续在育肥猪出现。有趣的是，后来分析表明，两个育肥舍中较旧的猪舍感染了PRRSV 。PRRSV 从保育舍根除后，新猪舍（与旧猪舍很近）才饲养生长猪，仍然为病毒阴性。

在2013年9月后半旬出现急性临床症状之前猪场并无流感病毒感染。因此这段时间的呼吸症状与流感无关。后来发现在育肥猪检测到PRRSV ，在2013年10月保育猪爆发流感之前，PRRSV 是一个主要因素，或者至少是病因之一。

2014年2月，育肥猪流感抗体血清转阳，通过PCR在病死猪的肺部和断奶仔猪和育肥猪的唾液中也检测到了病毒。这表明流感病毒很可能是呼吸和繁殖障碍的主要原因。其他群动物的育肥猪急性病可能是由流感病毒和PRRSV混合感染造成的。

根据收集到的证据，于是决定在分娩之前3周给母猪免疫。

结论

流感病毒在呼吸道上皮细胞复制，导致肺部炎性变化，怀孕母猪的胚胎和胎儿死亡。临床诊断并不简单，通过PCR检测发烧母猪鼻拭子或者发病动物肺部流感病毒是推荐的方法。唾液似乎能够替代血清作为PCR样本，因为检测唾液使得呼吸道或者环境中存在的其他病原也能检测到。此外，唾液采集更加简单，不需要人力，而且比采血对动物造成的应激小。

仅仅使用疫苗免疫方案就能实现PRRSV 快速从母猪和育肥猪根除，这似乎很令人惊奇，但是猪群非常有可能体内已经存在PRRSV 抗体，免疫有助于最终根除病毒。

木乃伊胎继续增加被认为是非传染因素造成的。