简介
2009年6月,我们接到布列塔尼市一猪场电话称三周前新引进的头两批后备母猪出现以下临床症状:
-
发烧(体温在40.5°C之上)
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厌食
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受胎率较低(头两批人工授精的后备母猪受胎率为86%,明显低于预期)
猪场概况
该自繁自养猪场位于布列塔尼市高密度养殖区,存栏560头母猪。从2009年1月5日、2月9日、3月23日、5月3日该猪场分四批引入子一代(F1)和祖代(GP)后备母猪。每批后备母猪进场当日,采集20-30头母猪血液冻存,为未来分析所用。
仔猪在21日龄断奶,精液从种猪场购买,猪场内部和外部生物安全措施非常到位。
F1和GP后备母猪来自两个健康水平高的核心种猪场,厂长的目标是最终自场繁育后备母猪。
两个核心种猪场的健康状况如下:
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSv):阴性
- 胸膜肺炎放线杆菌:所有血清型均阴性
- 伪狂犬:阴性
- 猪肺炎支原体:阴性
- 猪流感(H1N1、H1N2 和 H3N2):阴性
- 猪圆环病毒2型(PCV2):不免疫疫苗
后备母猪进场后的免疫程序包括免疫细小病毒、猪丹毒、猪流感(H1N1 和 H3N2)疫苗,进场后还要使用伊维菌素根除疥癣。
病情分析和初步诊断
2009年6月,也就是临床症状(发烧和厌食)出现3-4周之后,采集了10只发病后备母猪的血液。检测发现猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSv)、猪流感 (间接血凝试验)、猪肺炎支原体和细螺旋体(显微镜凝集试验)均呈阴性。
初胎繁殖结果很差:
产活仔数/窝 | 死胎率 | 木乃伊胎比例 | 断奶仔猪/窝 | |
1批 | 11.67 | 2.8 % | 2.5 % | 9.94 |
2批 | 9.94 | 3.3 % | 7.9 % | 9.24 |
3批 | 10.23 | 2.7 % | 13.0 % | 9.51 |
我们又利用血清学方法检测了25头发病后备母猪血液,发现细小病毒、钩端螺旋体和PRRSv均为阴性。
将11头木乃伊仔猪(来自3窝)送检到实验室。将每窝产下的木乃伊仔猪做成一份样品进行PCR检测:
- PRRSv:均为阴性
- 猪细小病毒:均为阴性
- PCV2:心脏和肝脏样品PCR结果阳性,心脏样品PCV2滴度为4.2*109 - 8*1011拷贝数/g,肝脏样品PCV2滴度为3.6*1010 - 1.8*1013拷贝数/g
组织学检查发现心脏单核细胞渗出,心脏免疫组化方法发现PCV2病原。
► 以上结果表明PCV2是临床症状的原因。
PCV2 血清学检测
我们决定利用血清学方法分析发病后备母猪的PCV2抗体水平,看一下新引进的后备母猪是否是在进入猪场之后、临床症状出现之前出现血清转阳现象。
在两个时间点采血:
- 每批后备母猪引进当天(BS1):从四批后备母猪随机选出110只母猪采血。
- 临床症状出现后(BS2): 采集45只发病后备母猪血液。
法国城堡镇实验室负责检测样品的PCV2抗体水平。
比较了每批和不同来源种猪场(F1或GP)的后备母猪PCV2抗体水平。利用T检验分析抗体滴度的均一度;或者使用非参数检验。显著性水平定为0.05。
本研究分析了45只后备母猪在进场当日和临床症状爆发后两个时间点的PCV2抗体滴度数据(见表1),研究了这45只母猪的血清转阳情况。
表1.进场当日 (BS1)和临床症状爆发后 (BS2) PCV2抗体滴度变化 (log10) 和标准差 (σ)
进场当日 (BS1) | 临床症状爆发后 (BS2) | BS1 和 BS2之间标准差 | |||||||
n | 均值±标准差 | 中值 | n | 均值±标准差 | 中值 | 均值±标准差 | 中值 | ||
1批 | 22 | 0.19 ±0.318 | 0.000 | 22 | 3.10 ±0.543 | 3.04 | 3.10 ±0.543 | 3.04 | |
3批 | 23 | 3.16 ±0.49 | 3.31 | 23 | 3.33 ±0.56 | 3.54 | 1.90 ±1.64 | 2.19 |
1批新进后备母猪全部血清转阳。3批后备母猪61.6% F1 后备母猪和60 % GP 后备母猪发生血清转阳。
► 我们可以得出结论就是:有些新进入猪场的后备母猪从未感染过PCV2,但是在进场之后到妊娠结束期间感染了PCV2,表现出PCV2临床症状。
我们也分析了四批后备母猪进场时的PCV2抗体情况(见表2)。
1批后备母猪进场时PCV2抗体为阴性,这批后备母猪全部来自F1后备母猪核心猪场。
随后引入的2、3、4批后备母猪也有一部分来自F1后备母猪核心猪场,但是这些母猪在进场时为PCV2抗体阳性(所有母猪PCV2抗体滴度在 1.3 log10之上, 38.8 %母猪PCV2抗体滴度在 3 log10以上)。
此外,2、3、4这三批母猪的PCV2抗体滴度值差别很大: 对于来自F1后备母猪核心场的后备母猪来说,第3批母猪的PCV2抗体平均值显著高于第2和4批(p=0.001),该值也高于GP后备母猪(p=0.107)。
对于2、3、4批后备母猪,每批F1后备母猪和GP后备母猪的PCV2抗体滴度无差异。
表2. 不同批次和不同来源(F1或GP)的后备母猪进场时PCV2滴度平均值(log10)
来源 | F1 (BS1) | GP (BS1) | 总计 | ||||||
n | 均值±标准差 | 中值 | n | 均值±标准差 | 中值 | n | 均值±标准差 | 中值 | |
批1 | 30 | 0.24 ±0.36 | 0.00 | 0 | - | - | 30 | 0.24 ±0.36 | 0.00 |
批2 | 20 | 2.54 ±0.49 | 2.56 | 10 | 2.69 ±0.29 | 2.64 | 30 | 2.69 ±0.44 | 2.57 |
批3 | 19 | 3.21 ±0.45 | 3.26 | 10 | 3.09 ±0.49 | 3.13 | 29 | 3.17 ±0.46 | 3.26 |
批4 | 10 | 2.46 ±0.77 | 2.61 | 5 | 2.97 ±0.45 | 2.72 | 15 | 2.62 ±0.708 | 2.64 |
总计 | 79 | 1.82 ±1.36 | 2.44 | 25 | 2.91 ±0.44 | 2.72 | 104 | 2.83 ±0.574 | 2.72 |
结论
首先,虽然PCV2无处不在,一些来自高健康水平种猪场的后备母猪在6月龄时仍未感染PCV2,体内没有PCV2抗体;其次,进场时,不同后备母猪PCV2血清学水平差异很大,进场时1批后备母猪PCV2抗体是阴性的,随后引入的3个批次均为阳性,抗体滴度差异大;最后,就是某批后备母猪的PCV2血清学数据无法用来预测另外几个批次的PCV2抗体滴度。
应对措施
在2009年7月,开始实施PCV2免疫方案:我们建议场长大面积免疫两次,间隔四周进行二免。
对于即将进行人工授精或者将要分娩的“高危”母猪群,建议在人工授精或者分娩之后2-4周免疫。
在分娩前每3-4周再次免疫。
在2009年9月,木乃伊胎的比例下降到一个可以接受的水平(0.51 / 母猪)。死胎数和受胎率转为正常。
3月 09日 – 5月 09日 | 9月 09 日– 12月 09日 | |
活仔数 / 母猪 | 11.83 | 12.46 |
木乃伊胎 /母猪 | 1.34 | 0.23 |
死胎 /母猪 | 0.32 | 0.35 |
断奶仔猪 /母猪 | 9.42 | 11.4 |
受胎率 | 86% | 88% |
讨论
PCV2对繁殖力的影响已经在临床和实验室条件下得到证明,PCV2主要影响从未感染或免疫的后备母猪。
本案例表明PCV2是后备母猪临床症状和繁殖障碍的原因。
最有趣的发现就是刚进场的后备母猪PCV2血清学水平的个体差异性。
对母猪繁殖障碍的诊断挑战性很大,成本很高,而且需要做全面的鉴别诊断。PCV2对后备母猪和初胎母猪的影响不容小觑。在这个猪场,我们未看到仔猪发生断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),甚至是繁殖障碍母猪产下的仔猪也未出现。
群体免疫两次,间隔四周进行二免,在分娩前每3-4周再次免疫,这个免疫程序经证明可以预防PCV2繁殖障碍。该场今天仍然在继续免疫,猪场的健康状况良好。