产仔监测
为了确定一个猪场PRRSV是否稳定,必须确认出生仔猪没有病毒血症。PRRSV经胎盘传播是非常有效的,特别是在妊娠末期,因此,如果母猪有病毒血症,则胎儿极有可能在子宫内被感染。
因此,我们必须在产房进行监测。理想情况下,应在出生时对仔猪进行测试,但由于很难对其进行测试,因此通常会在断奶前不久对其进行测试。如果结果为阴性,则可以确认在母猪中没有病毒传播。如果结果呈阳性,则应在出生时取样,以确定仔猪出生时是否已被感染或在哺乳期间被交叉感染。
血清是确定病毒存在的参考样本。最初,应从30头仔猪中采集血液样本,这可使我们能够以随机样本的95%置信水平检测10%的患病率。当对有疾病症状的动物进行采样时,其敏感性估计更高。在病毒循环非常低的情况下,例如在稳定计划的最后阶段或在临床上被认为稳定的猪场,此采样量可能不足,建议将样本量增加到60,这样我们就可以检测到5%或更高的患病率。由于病毒循环水平较低,应在很长一段时间内进行系统和连续的采样,因为可能在几个月的阴性结果后找到阳性样本。一旦我们开始看到阴性结果,我们至少应监测一个完整的繁殖周期。
考虑到从幼年动物上采集血液样本的难度、对其福利的影响以及检测如此低的患病率所需的高样本量,已经开发出了其他采样方法。一种选择是使用处理液——阉割和断尾时的渗出液。由于这种渗出液主要由血浆和血液组成,因此通常在仔猪有病毒血症时才发现该病毒,因此,与分析血清样本相比,增加样本量是一个很好的选择,其可保持良好的灵敏度。需要注意的是,处理液的使用仅适用于进行常规阉割的猪场。仅使用断尾时的处理液,灵敏度要低得多,不足以可靠地确定猪场的状态(Vialta等人,2018年)。
已证明脐带血是检测新生仔猪PRRSV的可行选择(Martin-Valls等,2018)。尽管该样本更容易获得,但需要在出生时进行收集,而且应该注意的是,可以检测到环境污染。但是,它是一种可靠的替代方法,可以方便地监测产仔情况,并且比仅来自断尾时的处理液更可取。
口腔液体也被确定为有效样本。这里的问题是,哺乳仔猪通常不会被绳子吸引,所以取样时间长,同窝仔猪的代表性低,这使其不可行。为了提高这项技术的实用性,将母猪纳入其中,母猪咀嚼绳子的行为可刺激仔猪咀嚼绳子,增加了该技术的敏感性。然而,这是一个仍在研究中的方法,并不是最佳选择。此外,还讨论了用浸过液体的湿巾从母猪乳房表面取样的可能性,其基本原理是,如果仔猪被感染,其口腔液体中会含有病毒,从而污染乳房。
虽然使用这项技术的经验不多,而且现在评估这个系统的价值还为时过早,但结果令人鼓舞,从产房表面取样获得的结果也是如此。然而,在这种情况下,正如我们提到的脐带血,有可能从阴性仔猪中获得阳性样本,这表明从环境中检测到病毒RNA,因此必须仔细解释结果(Vialta等人,2019年)。
最后,正在探索使用胴体样本(尤其是舌头)来确定死胎动物中是否存在病毒的可能性(Baliellas,2020年)。
母猪的监测
另一个关键点是检测后备母猪。这须包括在进入检疫区之前和离开检疫区前用ELISA和RT-PCR进行采样,以确认其健康状况,监测驯化的有效性,并知道发生感染的时间。应该使用诸如测序之类的工具来确认在适应期间发现的病毒株(即疫苗或田间病毒)。虽然这还不足以证实母猪不会对猪场构成危险,但我们至少必须检查它们进入妊娠舍时是否有病毒血症。
另一方面,监测繁殖母猪是极其困难的。血清学的价值不大,因为市场上没有标记疫苗,个体之间的S / P值差异很大,并且取决于引起感染的菌株(Kim等,2007),而且动物的血清抗体在数月内保持阳性。此外,在再次感染后通常没有二次反应,而且当它确实发生时,非常迅速,因此收集配对样本在确定病毒再循环方面通常没有什么用处。同样,用RT-PCR进行监测也不实用,因为在任何特定时间,病毒血症动物的数量都非常少,成年动物中的病毒血症和先天免疫力的时间也很短。这使得实际检测能力很低,不值得研究。如上所述,我们可以得出结论,对繁殖母猪进行监测只对阴性猪场和诊断疾病暴发有用。
相比之下,监测生长中的动物非常容易,几乎可以使用任何样本和技术。 唯一的考虑因素是使用的样本量和抽样系统,以便在预期流行水平的基础上很好地代表所研究的猪群。
来源:pig333