胚胎移植在家畜生产中越来越发挥出其重要作用,对养猪业的重要性也逐渐突显出来。尽管如此,养猪生产中胚胎移植仍未商业化的原因如下:
1) 猪胚胎冻存技术还未攻克;
2) 将胚胎放入受体猪的手术难度大;
尽管有上述两方面的难关要攻克,由于近年来猪胚胎冻存技术(玻璃化)和非手术胚胎移植技术(胚胎移入子宫深处)的发展,胚胎移植技术应用于养猪生产的前景越来越明朗(Martínez et al., 2004)。非手术胚胎移植技术是指在3-5min内将胚胎通过受体母猪子宫颈放入子宫角的过程,95%受体母猪表现出良好的耐受性(见下图)(Martínez et al., 2013)。
仔细擦拭受体母猪外阴,插入导管、注入胚胎
孕检和分娩控制
三年前,我们与西班牙SA公司合作启动了一项非手术胚胎移植项目。我们利用非手术胚胎移植方法将新鲜胚胎移入150只杜洛克受体母猪,每只受体母猪接受30只新鲜胚胎,最终获得了80%受胎率和9.5窝产仔数的成绩。该研究结果表明,供体母猪超速排卵处理后,每只受体母猪需要的供体母猪数在1.5-2之间(Angel et al., 2013);受体母猪之间发情相差至少24h,受体母猪迟于供体母猪24h发情,这对于胚胎移植的成功至关重要(Martinez et al., 2013);新鲜胚胎保存技术(保存24 h)为胚胎从供体猪场到受体猪场的国内和国际间运输提供了便利条件。这说明非手术方法移植新鲜胚胎(37℃保存24h)可以获得相当高的受胎率和窝产仔数。
但是,胚胎保存最好的方法还是冻存,因为它可以实现胚胎无限期保存,只要有移植的需要,可以立刻进行。非手术胚胎移植+冻存胚胎将会为种猪公司带来巨大益处:
1) 种猪公司可以将具有较高遗传价值的动物提供给自繁自养的客户猪场,不受时间限制;
2) 简化了动物的国际间运输,避免了动物福利问题;
3) 这可以最大限度保证种猪公司提供的优质种猪在受体猪场的健康状况;
4) 面临重大疫病时,实现遗传资源的无限期保存。
目前,玻璃化是猪胚胎冷冻保存的最有效方法。过去几年的研究表明,80-95%的胚胎经过体外玻璃化和加热处理后仍能够存活。尽管如此,但是很少有研究对玻璃化胚胎在体内存活情况进行研究。
我们的研究结果表明,通过手术方法将玻璃化冻存胚胎移入受体母猪当中,能够获得受胎率75%和窝产仔数10的成绩。但是如果通过非手术方法移植玻璃化冻存的胚胎,虽然窝产仔数仍然可以达到10,受胎率却下降到50%(Martinez et al., 2013)。很明显,如果将非手术移植方法和胚胎玻璃化冻存技术联合应用,我们还需要进行更多的研究增加受体母猪的受胎率。
本研究结果表明,非手术胚胎移植方法是可行的。该操作简单、安全、快速,受体母猪表现出良好的耐受性。非手术胚胎移植技术、新鲜胚胎保存技术、玻璃化胚胎冻存技术为胚胎移植在养猪生产上实现商业化提供了可能。
致谢
CDTI/S.Batalle (20090686)、MICINN-FEDER (AGL2009-12091)、MINECO-FEDER (AGL 2012-38621)、SENECA (GERM04543/07)等项目资助了此项研究。