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监测母猪场是否存在PRRS病毒可用于对养殖场的状态进行分类。经典的、应用最广泛的取样和分类系统是基于Holtkamp等人（2011）开发的，连续几个月每月采集一次血液样本。根据该方法，猪场被划分为：
- 当繁殖母猪ELISA阴性时为阴性
- 当断奶至少90天未检测到病毒血症猪时，为阳性稳定
- 当在任何组织中均未检测到病毒，但未实现至少90天的阴性PCR结果时，则被认为是阳性稳定。
- 同时，监测可用于评估PRRS爆发后采取的控制措施的有效性。在本案例，首要目的是在分娩时达到稳定，这意味着新生仔猪的所有组织中都没有病毒。第二个目标是实现断奶时的稳定性；最后，如果该猪场有保育阶段，则实现保育期结束时采集的样本中没有病毒。
用于PRRS监控的新型样本
在PRRS监测中，仅以血液作为唯一的样本类型，经过几年的发展，已开发出新的群体采样系统，如用绳索采集的口腔液体，广泛应用于保育猪和育肥猪。最近，Vilalta等人（2018）研究了从阉割和断尾过程中收集的处理液样本中检测PRRS病毒的新技术，并取得了良好的结果。研究结果表明，阉割处理液比断尾处理液效果更好。使用处理液可以对更多的动物进行采样，且采样频率更高，这对于在出生时携带病毒的动物比例较低的情况下检测PRRS病毒非常有用。当仔猪去势率较低时，该技术不可能得到实际应用。此外，根据欧洲动物福利条例，对常规断尾的限制也限制了选择断尾处理液作为样本的使用。
基于这些指导方针、目标和条件，来自西班牙Sanejament PorcíGrup de Sanejament的研究小组进行了一项研究，在收集部分死亡动物的样本的基础上，评估一种新的监测技术。将样品冷冻保存并以固定的频率送至实验室。通过收集和分析这类样本，我们可以确定在死亡动物组织中未检测到病毒的时间点。
根据最初的结果，我们认为从死胎仔猪身上采集舌头样本是确定仔猪出生时是否存在病毒的良好方法。
以死猪舌头组织为诊断样本
该方法的基础是收集至少2厘米长的舌头，将其冷冻储存在袋子或容器中，并以所需的频率（每月或分批）送至实验室。该方法具有良好的效果和许多优点。之所以选择舌头，是因为它是比尾巴更干净的样本，且能提供足够的液体，对于死亡仔猪来说，还存在唾液和羊水等其他样本（照片1）。此外，该法不需要专门的技术培训，故猪场工人可以自己采集样本。
在哺乳期、保育期或育肥期，使用相同的取样方法；一部分舌头取自研究期间死亡的动物。在这些情况下，根据死亡发生的阶段，将样本分别储存在三个容器中：保育期开始、育肥中期或末期。
在送往诊断实验室之前，将样品冷冻保存在袋子或容器中。在实验室进行处理以从舌头中提取液体。
用这种液体进行PCR以确定病毒的存在与否。也可以使用Sanger测序技术对病毒基因组的几个部分进行测序。
这种取样方法的基本要求是：猪场有一个冰柜，在研究期间内可采集足够数量的动物样本。
这种采样方法的主要优点是：
- 它允许更高频率地采集更多动物的样本。可以在哺乳期间常规收集所有死产动物和死亡动物的舌头。
- 采样不需要复杂的技术培训。猪场员工可以自己收集这种类型的样本。
- 消除了从活体动物中采集样品带来的应激。
- 在某些情况下，通过有针对性的采样以及增加动物采样数量，可以提高该技术的灵敏度和特异性。
- Sanger测序的质量通常优于口腔液体。
- 最后，与传统的每月采集血液样本相比，疾病监测的成本更低。
使用死猪样本监测PRRS，使我们能够在生产阶段获得重要的流行病学信息，故人们就不用花费过多精力来监测病毒的存在，如在仔猪出生，保育阶段和育肥阶段。
来源：pig333
