在过去几年里,对猪鼻支原体造成的断奶猪的多发性浆膜炎和关节炎的兴趣不断增加。推测此细菌是由母猪传播给其后代的;但是,对此细菌的流行病学和生态学所知有限。缺乏基本信息,如定植的时间,断奶后传播的动力学和母猪在此疾病传播中所起的作用。
此研究概括了在现代猪业中,为进一步了解该细菌的流行病学可使用的诊断方法(如定量聚合酶链反应,qPCR)和样本采集技巧(如口腔液体和鼻拭子)。
研究1. 估计有多发性浆膜炎的猪场的猪鼻支原体在鼻腔定植的流行性
3个猪群(从产子-断奶)被标位A,B,和C,每个猪群6000头猪,并选好保育舍。3个猪群均有猪鼻支原体感染的历史,然而只有A和B群在取样时,由多发性浆膜炎造成的高保育期死亡率。3个猪群采集的样本均包括:在1, 7, 14 和 21日龄时采集的60头母猪和60头仔猪的鼻拭子,在28, 35, 42, 49, 56, 63, 70和77日龄采集的30头猪的鼻拭子。此外,鉴于猪鼻支原体可在口咽部表面检测到,对某保育期饲喂栏的所有仔猪每天采集口腔液体。为了研究猪鼻支原体在多发性浆膜炎中的作用,在保育期死亡率高峰期时,从10头临床感染和10头健康仔猪的尸体采集组织样本。用定量聚合酶链反应检测猪鼻支原体
实验结果
研究发现,在5头来自A群(60头),3 头来自B群(60头)的母猪的鼻腔中检测到猪鼻支原体,C群未检测到猪鼻支原体。A和B群存在猪鼻支原体临床病例,哺乳仔猪的患病率较低(平均8%),断奶仔猪的患病率较高(平均98%)。相反,在C群,没有猪鼻支原体临床病例,直到保育期最后一周,仔猪的患病率都很低。A和B群,采集的8份断奶仔猪的口腔液体样本中有7份为猪鼻支原体阳性,而C群只检测到1份样本阳性(共8份样本)。多发性浆膜炎在3群健康猪中均为观察到,在C群的发病猪中亦未发现多发性浆膜炎。然而,在A和B群的患病猪(各共10头)中各有9头和4头检测到多发性浆膜炎。(如图1)。在A群的8头和B群的3头患病猪的心包中,用PCR检测到猪鼻支原体。在C群尸检中,用PCR未检测到猪鼻支原体。
图1:患有猪鼻支原体系统疾的猪病观察到心包炎
研究2: 对2个商品猪场的猪鼻支原体流行性的前瞻性纵向研究
根据多发性浆膜炎流行史和未使用猪鼻支原体疫苗,选择2个种猪群,A和B群。每个猪群,在猪生长各个阶段纵向采样。随机选取50头青年母猪(p1 and p2)和50头较大的母猪(p3 和更大),并用定量聚合酶链反应(qPCR)检测鼻拭子的猪鼻支原体,用ELISA检测血清的猪鼻支原体抗体。
图2:采集母猪鼻拭子,用qPCR检测猪鼻支原体
从每头母猪随机选择一头仔猪并标记耳号,共选取100头仔猪。出生时,断奶当天和断奶后10天采集每头仔猪的鼻拭子和血清样本(图3-4)。在多发性浆膜炎/关节炎/肺炎高发时,对保育期和育成期猪又进行了2次采样。为了证实猪鼻支原体在多发性浆膜炎中的作用,在此2次取样时,共12头猪被安乐死并进行尸检(10头为临床患病,2头为临床健康)。在每次断奶仔猪采样时,同时采集口腔液体,共采集56份口腔样本。总之,共从216头母猪和216头仔猪采集了1050份鼻拭子,共采集了10次样本。
图3:采样前仔猪的耳号 |
图4:出生后不久,从仔猪采集的鼻拭子 |
研究发现
用qPCR检测鼻腔拭子,A群5头(共107头),B群2头(共110头)母猪检测到猪鼻支原体。4头阳性猪是第1或者第2胎,3头阳性猪是第3胎。2个猪群哺乳仔猪该病患病率均较低(平均为1.7%),但在断奶仔猪中较高(平均为85%)。很多仔猪在移入保育舍后不久就被感染,此后在整个保育和育肥育成阶段均保持为阳性。抗体滴度结果显示,在2个猪群,仔猪出生后不久就能检测到猪鼻支原体抗体(母源抗体)。母源抗体滴度在断奶后开始降低。在A和B群,抗体滴度分别在94和64日龄时开始上升。据推测,这可能是由于免疫反应引起的。在A群,25份口腔液体样本(共31份)检测为阳性。此外,猪鼻支原体在口腔和鼻腔的检测结果是一致的。在A群,在病猪的心包(12/18)和关节(10/18)检测到猪鼻支原体。在B群在病猪的心包(5/10)和关节(4/10)检测到猪鼻支原体。在健康猪群的相同组织样本中未检测到猪鼻支原体。所有尸检猪鼻腔均检测到猪鼻支原体PCR阳性。
最后需要考虑的事项
猪鼻支原体普遍存在于猪的鼻腔,但其并非在所有猪中都同时定植并大量繁殖。我们推测少数感染仔猪是该病在断奶阶段流行的主要传染源
用口腔液体做样本检测猪鼻支原体是一个很好的方法,可追踪猪群该病的感染动力学,从而可使我们确定一个合适的抗生素用药或者疫苗接种时间。但对用口腔液体检测猪鼻支原体还需进一步证实
了解该病在猪群中的感染动力学可使我们更好的对感染猪群实施相应的控制措施