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通过饮水或饲料引起感染所需的ASF病毒量?

在饲料原料销售全球化的今天,我们知道ASF病毒通过饲料或饮水传播的最低感染剂量吗?

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Niederwerder MC, Stoian A, Rowland R, Dritz SS, Petrovan V, Constance LA, et al. 通过饮水或饲料感染非洲猪瘟病毒的感染剂量。Emerg Infect Dis. 2019;25(5):891-897. https://dx.doi.org/10.3201/eid2505.181495

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评论

正在影响中欧和亚洲的非洲猪瘟疫情令我们感到震惊,一些猪场易受感染,包括一些物安全水平良好的猪场。罗马尼亚或保加利亚一些受感染的商品猪场就是这样。罗马尼亚官方兽医机构认为多瑙河的水可能是其中一个大型猪场感染的源头,这一事实为我们敲响了警钟,当查阅文献时,未找到这方面的数据。

本文首次确定了ASF通过饮水和饲料传播的最小感染剂量。受污染的水或饲料可传播疾病,这一点不足为奇,正如我们多年以来所知,用受污染的饲料饲喂猪是ASF感染的主要途径之一。但我认为,重要的是不要惊慌失措,并认为猪场中使用的所有饲料或饮水都是感染源,尤其是考虑到西班牙在该病上的经验。为了更好地理解,我们进行了一些计算,以表明饮水中病毒浓度达到感染浓度的实际几率是多少。为了使其更加形象化,我以理论上因多瑙河水而感染的猪场为例。为了达到101 的半数组织培养感染量,有人知道应将多少头感染死猪扔进多瑙河么?考虑到多瑙河的平均流量:6500立方米/秒,并考虑到扔入多瑙河的猪的平均体重为50公斤,这些猪的血液(65ml/kg体重)都被释放到多瑙河中,血液中的病毒浓度与急性感染病例中检测到的浓度相同:3 x 106 拷贝/ 200微升(Blome等,2013)。必须每天至少将115头猪扔进河里,且其体内的所有血液都要释放到多瑙河中,且该水源未经过任何能够降低其病毒载量的消毒系统。

就原材料而言,传染性病毒载量应大于105.6 TCID50,因此,如果我们考虑到猪场中的可能污染源,这似乎是一种不太可能的传播路径,但如果在储存过程中发生污染,这可能是一个需要考虑的因素。

鉴于本研究,在考虑猪场生物安全性时,我们应考虑饮用水的消毒,特别是饮水来自可能有一定污染风险的水源(如河流或水渠),最重要的是确保供应商和用户都有安全的储存系统,防止原料/饲料与污染源(如其他动物:啮齿动物、鸟类、野猪)接触。

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Niederwerder MC, Stoian A, Rowland R, Dritz SS, Petrovan V, Constance LA, et al. 通过饮水或饲料感染非洲猪瘟病毒的感染剂量。Emerg Infect Dis. 2019;25(5):891-897. https://dx.doi.org/10.3201/eid2505.181495

实验内容

非洲猪瘟病毒(ASFV)是一种传染性强,传播迅速的跨界动物疾病,对全球猪肉生产构成重大威胁。基于植物的饲料可能是将病毒引入猪场的潜在途径,但对于ASFV通过饲料或饮水传播的风险知之甚少。本研究的目的是通过饮水和饲料,经口感染以确定佐治亚州2007年ASFV毒株的最低和中等感染剂量。

How was it done?

在生物安全3级的封闭设施中,对68头52日龄左右的健康杂交猪进行了7次不同剂量的重复感染试验。病毒是从佐治亚州2007年ASFV急性感染猪的脾脏中采集的(目前在欧洲和亚洲流行的菌株)。将病毒稀释为100 - 108 TCID50 / 毫升(每毫升50%组织培养感染剂量)的不同稀释度,然后将其添加到100毫升液体培养基(RPMI)或100克全价料中(不含动物成分)。采用连续评估法确定ID50,优化剂量测定曲线,确定感染剂量。限制饮水10-14小时,以确保添加液体或饲料的消耗量。

将未攻毒的对照猪与攻毒猪分别饲养在不同的饲栏中。猪暴露于单剂量的ASFV。在单次暴露的基础上,作者模拟了重复暴露,假设重复暴露是独立事件。计算出多次暴露的感染概率为1-(1-p)q,p=单次暴露概率和q=暴露次数。

每天对猪进行两次临床检查,直到第5天进行安乐死,若更早观察到ASF的临床症状则及时实施安乐死。

通过3种测试确认感染:血液PCR,脾PCR或脾病毒分离。

实验结果和启示

32头猪出现ASF感染症状(通过病毒分离和脾脏PCR检测,16头猪呈阳性,单纯脾脏病毒分离8头猪呈阳性,8头猪在各项试验中均为阳性)。

总体而言,感染的可能性随着剂量的增加而增加。液体中ASFV的最小感染剂量为100 50%组织培养感染剂量(TCID50),而饲料中为104 TCID50。 液体的中位感染剂量为101.0 TCID50,饲料为106.8 TCID50。

表1:通过液体或饲料经口感染的测定结果以确定摄入ASFV的感染剂量

ASF病毒剂量,TCID50 液体培养基 植物性饲料
阳性率 阳性率
100 37.5 -
101 44.4 -
102 75 -
103 83.3 0
104 100 40
105 - 44.4
106 - 25
107 - 40
108 - 50

TCID50,50%组织培养感染剂量;–没有测试猪。

当模拟多次暴露时,液体和饲料的所有剂量水平的感染率均增加。在含有1 TCID50的最低剂量下,用含有ASFV的液体进行10次暴露的概率接近1。

结论

本文证明,尽管植物性饲料需要较高的感染剂量,但佐治亚州2007年ASFV可通过饮水和饲料经口传播。

饮水中低感染剂量的ASFV应被认为是ASF通过饮水传播的可能因素。

尽管与液体相比,饲料中的最低感染剂量更高,但作者认为,饲料可能比饮水具有更高的风险,因为饲料运输是一个高频率事件,而集约化的饲料生产所使用的原料来自世界各地。从而可能将受污染的饲料销售给众多的猪场。

来源:pig333

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