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副猪嗜血杆菌（HPS）一直是生猪养殖业的一大问题，可导致纤维素性多发性浆膜炎，脑膜炎和关节炎，通常被称为革拉泽氏病。它被认为是保育阶段最常见的细菌感染之一，且控制这种疾病的常规药物是一个新的问题。 事实上，在爱荷华州立大学兽医诊断实验室（ISU VDL）通过HPS PCR测试的所有系统样本中，超过50％是阳性的（图1）。
图1: 2013-2017年提交的病例中，通过PCR检测全身样本中检测到副猪嗜血杆菌。ISU数据库2018。
就疫苗接种而言，全细胞灭活产品通常仅对相同血清型的菌株具有保护作用。HPS是一种高度多样性的病原体，已经通过琼脂凝胶沉淀试验（AGPT）和间接血细胞凝集（IHA）鉴定了15种血清型（Turni和Balckall，2005）。 这些血清分型方法基于表面抗原之间的反应，如荚膜多糖和抗血清之间的反应。尽管传统的血清分型是HPS最常用的表征方法，但无法对相当多的分离株进行分型。
分子方法的进一步发展导致多重血清分型PCR的发展（Howell等，2015; Lacouture等，2017）。该PCR的使用基于荚膜基因座上血清型特异性变异的特异性引物，能够区分15种HPS血清型中的14种。 未发现可区分血清型5和12的荚膜多糖基因。2017年，贾和同事提出了一种新的HPS血清型特异性PCR方法，特别是含有区分血清型12和血清型5的引物。但血清型12的引物是基于一个假设的基因，需进行进一步的研究。
血清分型PCR和IHA间的比较表明，两种方法对88％的HPS分离株的检测结果相同。观察到的差异可能是由于IHA方法的复杂性造成的。最显着的差异是，不可分型菌株（使用抗血清无法进行血清分型的菌株）的数量显着减少，（Howell等人，2015; Lacouture等人，2017）。 血清分型PCR已经过优化，现由ISU VDL提供。
当分析了216株从提交给ISU VDL的猪样本中分离出的HPS菌株的亚型时，仅有3株（0.5%）不能通过血清分型PCR进行分型，与传统方法（15-41%）相比，不可分型数量显著减少。最常见的是血清型4（24%），7（26.7%），1（14.8%），2（13.4%），5/12（13%）和13（10.2%），其次是血清型14（5.6%）和6（0.9%）（图2）。这些血清型在美国、加拿大、欧洲和中国也普遍存在。
图2：通过血清分型PCR鉴定的呼吸系统和全身分离株中副猪嗜血杆菌血清型的分布。
本次采集的的大多数HPS分离株来自受肺炎和多浆膜炎影响的患病猪。HPS分离的部位主要是肺部（图2），其次是全身各个部位，如心包（21％），胸膜（7％），关节（5％），男性（3.7％），腹膜（1.4％）和纤维蛋白（0.5％）。这一事实有力地表明，这些菌株是具有毒力的，以能抵抗血清杀伤和吞噬作用，两者都是HPS公认的毒力机制（Cerda-Cuellar＆Aragon，2008; Olvera等，2009）。 甚至从系统性位点分离出先前被Kielstein-Rapp-Grabrielson方法（Kielstein＆Rapp-Gabrielson，1992）分类为非毒性的血清型6和7。可从健康猪的肺中分离出HPS，且常见共感染。故应考虑是否存在感染同一动物的其他潜在毒力株。
对从美国6个不同的猪生产系统中采集的123个HPS分离物进行分析，以评估系统内血清型的频率。在这些系统中观察到血清型的高度变异性，特别是因为每个系统由几个不同的猪场组成。然而，在大多数情况下，一种生产系统中仅有一种血清型占优势。此外，我们发现所有系统中都存在血清型4（23.5％，29/123）和7（22.7％，28/123）（图3）。
图3：副猪嗜血杆菌在6种不同猪生产系统中的分布。
需要多种方法来控制HPS。第一步是鉴定患病猪中出现的分离物。 监测猪群中HPS血清型对疾病控制至关重要。血清分型PCR和VtaA PCR是实用的方法，特别是在选择用于自体疫苗的毒性血清型方面，通过混合具有相同来源的血清型来改善猪生产管理，并防止将具有潜在毒性的HPS菌株的猪引入阴性猪群。
