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简介
该案例发生在2010年夏天美国中西部。该猪场是一个自繁自养猪场，妊娠舍和产房存栏母猪150只，保育舍共有断奶仔猪400只，育肥舍存栏800只肥育猪。此外，该猪场一栋猪舍为实体地面，地下设有水沟， 13只公猪饲养在这栋猪舍内。案例发生时，猪场存栏包括75只母猪、700只育肥猪、13只公猪。该猪场公猪精液不仅用于场内母猪配种，也在国内外销售。
该猪场联系到兽医，咨询如何在远东销售一只公猪的精液。出口精液必须满足承销国对精液品质的要求，于是该兽医询问了美国农业部动植物卫生检验局（APHIS）的兽医，对出口精液需要进行的检验进行了咨询。该场精液打算销往日本，日本规定进口精液应该在出口前60天检测水泡性口炎、伪狂犬病病毒、蓝耳病病毒、布鲁氏菌、钩端螺旋体以及结核杆菌。
结核菌素测试依赖于皮内注射结核菌素（USDA注册）引起的迟发型变态反应，这需要从国家动物保健部门或者APHIS兽医中心购买结核菌素。此外，结核菌素测试人员必须是执业兽医。
在做结核菌素测试之前，公猪不能给予任何抗生素、驱虫药或疫苗，这是为了保证公猪的健康和福利。药物或疫苗可以影响免疫功能，进而影响结核菌素测试结果，而该测试就是依赖于针对注射的结核菌素的免疫反应。此外，结核菌素测试需要准备的材料包括结核菌素测试记录表6-22 、一次性1ml塑料针管和针头。
结核菌素测试需要在右耳耳根处注射0.1ml牛结核菌素，左耳同样部位注射0.1ml禽结核菌素复合体。注射时，要将注射部位周围的伤疤、虫咬或者皮肤异常标记下来，以免读结果时，与结核菌素引起的反应造成混淆。注射48小时后读结果，其它哺乳动物72小时后读结果，在注射部位寻找硬结或者炎症突起。结果分为阳性、可疑、阴性。硬结直径＞3mm视为阳性，硬结直径＜3mm视为可疑，无硬结视为阴性。
猪场结核菌素测试
在进行结核菌素测试之前，需要进猪场观察猪群的健康状况。总体来讲，该猪场猪群（包括种猪）健康状况和生产指标良好，未在任何生产阶段发现严重的临床疾病。
图. 1
我们使用绳套保定了这只将出口公猪，按照前述的结核菌素测试要求注射结核菌素抗原。48小时后读结果，结果发现禽结核菌素注射部位皮肤明显增厚，而牛结核菌素注射部位无任何变化（见图1），这只猪视为禽结核菌素可疑。猪场咨询了兽医，兽医提供了两点可选方案，方案一将这只可疑公猪卖到美国食品安全和检测局（FSIS）规定的屠宰场，安乐死后进行剖检；方案二隔离整个公猪群猪舍，对其它公猪进行结核菌素测试，60天后重新检测这只禽结核可疑公猪。考虑到这只禽结核杆菌可疑公猪的经济价值，该猪场选择了方案二。
第二周，猪场对其它12只公猪进行了结核菌素测试，1只公猪由于淘汰到FSIS下辖的屠宰场未能做测试。注射后的结果表明，10只公猪未出现结核菌素反应，1只公猪禽结核菌素注射部位突起且充血，这只公猪视为结核杆菌阳性。猪场咨询兽医后，兽医依旧提出了两个方案，方案一将这两只出现结核菌素反应的公猪出栏、安乐死处理；方案二隔离公猪群、60天后再次对这两只公猪进行结核菌素测试。该猪场选择了方案二。
图. 2
60天后，第二次结核菌素测试结果表明，这两只公猪对禽结核菌素表现出很强的免疫反应（图2-4）。第一次结核菌素测试阳性的公猪被送检到国家兽医诊断实验室进行剖检，未见组织学病变。第一次结核菌素测试可疑的公猪重新回到隔离公猪舍，继续为国内市场提供精液。
图. 3
图. 4
回顾性流行病学调查结果表明，这两只公猪是唯一两只在场外饲养的公猪。第一只公猪（第一次结核菌素测试可疑的公猪）测试之前曾在场外舍饲养了一年。第二只公猪（第一次结核菌素测试阳性的公猪）在测试之前的几个月饲养在场外猪舍。场外舍为开放猪舍，有许多野鸟在那里筑巢，而且未能充分消毒清洗。
假阳性结果不太可能，这是因为两只公猪饲养环境的相似性，可能具有相似的感染源与传播途径。感染后机体清除了病原体，不表现明显症状，或者表现出亚临床感染（Martín-Hernando MP, 2007）是很常见的。场外猪舍可能就是潜在传染源，两只公猪可能通过饲养在场外猪舍而感染了结核杆菌，还有一种可能就是第一只公猪在场外舍感染结核杆菌后，通过水平传播将结核杆菌传染给第二只公猪，这是由于这两只公猪面对面饲养。建议该猪场提高所有生产阶段猪的生物安全措施，找到一个能够驱鸟的隔离猪舍。
讨论
在美国由于结核病发病率低，因此常规检测不包括结核菌素测试。根据FSIS动物去向汇报系统，在2008年，1.15亿屠宰尸体中只有0.02%的屠宰猪有结核病造成的病变。但是，近年来也有猪场因结核病爆发而造成经济损失。锯末垫料污染、降温系统和饲料污染等都是可能得传染源(Daniels CS et al, 2009; Álvarez J et al, 2011; Lower AJ, 2011)。其他的传染源还包括猪饲喂了未经巴氏消毒的奶制品、直接与牛接触、饲喂内脏、接触禽污染的地方、与野鸟接触、猪之间的直接传播等(Thoen CO, 2006)。污染的物品和猪舍是一个长期的威胁，这是由于结核杆菌对环境有很强的抵抗力。
三种造成猪结核病的细菌（结核分支杆菌、牛分支杆菌、禽分支杆菌复合体）中，禽结核分枝杆菌造成的人畜共患威胁最小，它仅仅对免疫缺陷病人造成威胁（Falkinham JO, 2003）。禽结核分枝杆菌复合体包括8种细菌和许多亚种，这些细菌的致病力、环境分布、宿主不同（Neuman EJ, 2010）。猪感染结核杆菌后，通常不表现明显的临床症状。年龄大的猪虽然采食正常，但仍日渐消瘦。只有结核杆菌分离、鉴定、分型后才能确诊结核感染。预防结核病主要通过防止猪群暴露在传染性结核分枝杆菌污染的环境中。猪群、垫料、饲料应该远离鸟类及其他结核菌感染动物。
结核病是一种不会造成临床症状或者对生产或者人畜共患病造成威胁的疾病，但是它是需要报告的疾病。该猪场对其精液进行结核菌素测试，旨在拉近与国际市场的距离，增加猪场收入。但是在这个过程中，除了结核菌素测试费用外，该猪场也承受了两只猪的淘汰费用。