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养殖场简介
此研究在希腊的一个的商品猪场（从产子到育成）的种猪群完成。猪场在产母猪650头（商品代大白和长白杂交）和35头祖代母猪（用于生产F1代小母猪）。断奶母猪和小母猪单独饲养30-35天后，用来自同一公猪的新鲜精液人工授精2次。在妊娠20-35天时，母猪被转到群体饲喂栏（每组10头母猪）。猪场种猪和断奶母猪的免疫程序见表1.寄生虫预防程序包括：母猪产前14天注射一次伊维菌素，公猪一年注射2次伊维菌素。
该猪场蓝耳病呈阳性，此研究开始前一年种猪群和断奶到育成阶段的猪群爆发了蓝耳病，[30% 种猪群，90% 断奶仔猪，35% 育肥/育成猪的聚合酶链反应（PCR）阳性].
表1.种猪群和断奶仔猪的免疫程序
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案例研究
90%的种猪群患有多形性红斑，同时伴有呼吸系统问题，但未出现死亡。从2014年1月到2014年5月（临床检查时间），母猪在妊娠30-35天时被转到群体饲喂栏，并出现了多形性红斑，表现为在全身皮肤特别是脖子，面部，眼和耳朵周围出现了红色凸起（见图1-3）。除此之外，病猪还可见抑郁，厌食，持续1-3天的高热(40-41.5度)，运动困难和呼吸系统症状（中度呼吸困难，流泪和鼻涕，并伴随粘液和血（图4-5）。在泌乳期和新近断奶的母猪中未发现上述症状， 或在刚刚引进小母猪但并未授精的猪舍亦未发现上述症状。上述临床症状在90%的妊娠母猪（群体饲养）和祖代母猪/小母猪群中可持续存在数周。此外，10-15%的授精母猪和小母猪在转入群体饲喂栏后不久出现返情现象（表2）
表2 2014年猪场繁殖参数
| 繁殖参数 | 月份 | |||||||||||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | 8 | 9 | 10 | 11 | 12 | |
| 产子率(%) | 72 | 68.7 | 71.4 | 73.8 | 74.9 | 78.1 | 77.3 | 67.4 | 76.3 | 85.0 | 92.5 | 94.2 |
| 流产率 (%) | 1.9 | 2.2 | 2.4 | 2.1 | 2.0 | 1.8 | 1.6 | 1.5 | 1.1 | 0.5 | 0.4 | 0.2 |
| 返情率 (%) | 26.0 | 29.0 | 26.0 | 24.0 | 23.0 | 20.0 | 21.0 | 31.0 | 22.5 | 14.4 | 7.0 | 5.5 |
| 分娩障碍率 (%) | 0.1 | 0.1 | 0.2 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 | 0.1 |
| 产活仔数/窝 | 13.2 | 13.2 | 13.1 | 13.2 | 13.2 | 13.1 | 13.3 | 13.1 | 13.2 | 12.9 | 13.1 | 13.1 |
| 断奶仔猪数/母猪 | 10.7 | 10.9 | 10.8 | 10.8 | 10.9 | 11.0 | 11.1 | 11.1 | 11.2 | 11.4 | 11.6 | 11.8 |
图1-2：群体饲喂栏患有多形性红斑的病猪，表现为全身皮肤出现红色凸起
图3：群体饲喂栏患有多形性红斑的病猪，表现为脖子和面部（特别是眼和耳朵周围）皮肤出现红色凸起
图4-5：患有多形性红斑的病猪，表现为 抑郁，厌食，高热，中度呼吸困难，流泪和鼻涕，并伴随粘液和血
取样和检查
于2014年5月取7头患病母猪的血液样本和4头患病母猪的鼻和阴道拭子（取样的猪为妊娠30-45天）。此外，于2014年8月取7头患病母猪的鼻拭子。
通过以下方法检测血清样本：a)通过定量聚合酶链反应（qPCR）检测蓝耳病毒（1型-蓝耳病毒欧洲型和2型-蓝耳病毒美国型）和猪圆环病毒2型和b型)通过酶联免疫吸附试验检测胸膜肺炎放线杆菌（APP）抗体，红斑丹毒丝菌抗体，蓝耳病抗体，腺病毒抗体，非洲猪瘟抗体，典型猪瘟抗体，和钩端螺旋体抗体。鼻拭子通过PCR检测胸膜肺炎放线杆菌的抗坏血酸过氧化物酶-IV，支气管炎博德特菌，嗜血杆菌，多杀性巴氏杆菌，链球菌，猪巨细胞病毒（PCMV，包涵体鼻炎）和猪流感病毒(H1N1, H3N2, H1N2)
除此之外，从病猪采集的2个血液样本（含抗凝剂，严格的无菌操作和灭菌设备）用于血液培养。此外，对血液样本进行了血液学和生化学分析。在屠宰场，取7头病猪的样本（皮肤，肝脏，肾脏和肺）用于肉眼和显微镜检查。
此外，用高效液相色谱法(Varian 9010 & 9050)检测妊娠期和哺乳期全价料样本的霉菌毒素[黄曲霉毒素 (B1, B2, G1, G2)，呕吐霉素(DΟN)，乙酰脱氧瓜萎镰菌醇(acetyl-DΟN)，瓜萎镰菌醇，玉米烯酮(ΖEΝ)]
实验结果
血清样本的ELISA 和 PCR检测结果见表3.所有的母猪均为胸膜肺炎放线杆菌和蓝耳病阳性，但非洲猪瘟病毒，典型猪瘟病毒，腺病毒和钩端螺旋体病呈血清学阴性。此外，未检测到蓝耳病和猪圆环病毒2型病毒血症。鼻拭子检测结果见表4.所有样本均检测到支气管炎博德特菌，多杀性巴氏杆菌和猪巨细胞病毒。所有样本均检测到链球菌，其中一样本（样本11）检测到胸膜肺炎放线杆菌，嗜血杆菌和链球菌阳性，另一样本为猪流感病毒阳性（2014年5月取样）
表3:出现皮肤病变和呼吸系统症状的7头母猪的血清样本检测结果
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*蓝耳病抗体ELISA结果：< 0.4 阴性; 0.4-0.99 阳性 1; 1.0-1.49阳性2; 1.5-1.99阳性3; 2.0-2.49阳性4; 2.5-2.99阳性5; ≥ 3.0阳性6
** 阳性野毒毒感染（针对AKgE的抗体-阴性：未发现野毒感染（未检测到针对AKgE的抗体）
***波摩拿群，塔拉索夫群，犬群，流感伤寒群，所有样本均< 1:100
表4：病猪鼻拭子的PCR检测结果
| 阳性猪数量 /检测数量 | 病原体 | ||||||
| App | 支气管炎博德特菌 | 嗜血杆菌 | 多杀性巴氏杆菌 | 猪巨细胞病毒 | 链球菌 | 猪流感病毒 | |
| 2014年5月 | 1/4 | 0/4 | 1/4 | 0/4 | 0/4 | 4/4 | 1/4 (H1N1) |
| 2014年8月 | 1/7 | 0/7 | 6/7 | 0/7 | 0/7 | 7/7 | 0/7 |
所有阴道拭子样本均检测到大肠杆菌和链球菌阳性。从血液培养分离链球菌和放线杆菌，抗菌谱显示它们对青霉素，氨苄西林和阿莫西林+克拉维酸组合敏感
一案例的血液学和生化学分析显示中等程度的白细胞增多症（异型淋巴细胞）和淋巴细胞减少症（可能继发于CD4淋巴细胞的损耗），轻微的贫血和血小板减少症。另2个案例中可见嗜酸性粒细胞数大于3000/μL。2案例中白细胞数量显著增加与感染一致。皮肤的组织病理学检查发现真皮表层和中间层血管化现象（图6）。在其他器官的检查未发现明显病变
妊娠和哺乳期全价料中未检测到霉菌毒素
图6：皮肤组织病理学检查：主要出现真皮的表面和中间层血管化
采取的措施
2014年5月，在断奶当天，所有母猪注射阿莫西林+克拉维以治疗生殖系统的大肠杆菌和链球菌感染，在母猪/小母猪转到群体饲喂栏的第一周，在饲料中添加400 ppm的阿莫西林。此外，对所有患病母猪额外饲喂3天阿司匹林。为减少母猪攻击性，在母猪的脖子和上背部使用了一种具有苦味的产品（基于中草药）
2014年8月，母猪/小母猪常规接种猪流感和嗜血杆菌疫苗，后备母猪常规接种胸膜肺炎放线杆菌疫苗。疫苗接种后2个月临床症状明显减少（多形性红斑和呼吸系统症状等）
案例进展/结论
应激可损害免疫功能，在群体饲养时，猪在应激的状态下更易感染病菌。此外应激还有可能激活亚临床感染。最近的临床案例中，当人工授精的母猪/小母猪免疫力低下时，应激使它们更易受感染，进而发病。已知群体饲养可造成应激，对免疫功能起到负面影响。多形性红斑是由感染或者发病引起的过敏性反应，此案例中多形性红斑可能是由发热（由链球菌，嗜血杆菌和胸膜肺炎放线杆菌引起）和应激（混群和争斗）引起的。猪流感不太可能是该病的病因，因流感并未感染其它母猪，且通常在混群后不常出现。
目前，在初步控制临床症状和针对猪流感和嗜血杆菌的加强免疫后，通常观察到零星的病例，且在发病数量和严重性上大大降低。零星病例通常出现在小母猪人工授精和混群后（妊娠30-35天）。治疗程序包括：注射阿莫西林+克拉维酸和美洛昔康/48小时内注射2次。亦可注射阿莫西林+克拉维酸/48小时内注射2次，并额外连续3天添加阿司匹林
总之，混饲条件下的应激可能是导致此临床案例的诱因，因亚临床感染或不同的呼吸系统病原体的交互作用可能被激活，对种猪的健康状况和生产性能产生了负面的影响。
