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随着非洲猪瘟病毒（ASFV）在全球的传播，有证据表明饲料和/或饲料原料可能是病原体传播的潜在载体，了解饲料生产业在这种高毒力病毒的潜在传播方面可能发挥的作用至关重要。在堪萨斯州立大学生物安全研究所的生物安全3级Ag动物室建造了一个中试规模的饲料厂，包括混合器、斗式提升机和相关喷动装置。在引入ASFV污染饲料之前和之后，总共对设备上和房间内的18个不同地点进行了擦拭，以评估环境污染。首先，通过系统生产一批饲料，以确认饲料厂为ASFV阴性；然后将ASFV污染的饲料加入到混合器中，并使用其他未污染的饲料原料生产。充分混合后通过斗式提升机排出。随后，又生产了四批不含ASFV的饲料。每批饲料排出后收集环境拭子，位置分为四个区域：A）饲料接触面，B）非饲料接触面，但距离饲料小于3.2英尺，C）非饲料接触面，距离饲料3.2英尺以上，以及D）移动的表面，如工人穿的鞋子。在BSL-3实验室环境中，使用P72 ASFV基因的qPCR分析对环境拭子进行分析，以检测ASFV特异性DNA。
在添加ASFV污染的饲料之前收集的环境拭子的ASFV DNA呈阴性。生产ASFV污染饲料后收集的环境拭子导致A-D区污染。ASFV-DNA污染水平以每毫升Ct值或基因组拷贝数（CN）报告。在此设置中，在整个实验过程中，没有证据表明取样区和批次之间存在相互作用，取样地点或饲料批次之间的ASFV阳性反应比例也没有差异。这表明，一旦ASFV进入设施，污染便会迅速蔓延并持续存在于环境表面，即使在后续生产ASFV未污染的饲料批次中也是如此。与所有其他表面相比，移动表面（D区）的样本具有更多可检测的ASFV（较低的Ct值），表明ASFV污染水平较高（高CN值）。与生产ASFV污染的饲料后立即采集的样本相比，在其后生产第三批饲料后采集的样本检测到的ASFV较少（Ct值较大），表明在随后重复的饲料生产过程中ASFV污染水平较低（CN值较低）。
在添加ASFV污染的饲料之前收集的环境拭子的ASFV DNA呈阴性。生产ASFV污染饲料后收集的环境拭子导致A-D区污染。ASFV-DNA污染水平以每毫升Ct值或基因组拷贝数（CN）报告。在此设置中，在整个实验过程中，没有证据表明取样区和批次之间存在相互作用，取样地点或饲料批次之间的ASFV阳性反应比例也没有差异。这表明，一旦ASFV进入设施，污染便会迅速蔓延并持续存在于环境表面，即使在后续生产ASFV未污染的饲料批次中也是如此。与所有其他表面相比，移动表面（D区）的样本具有更多可检测的ASFV（较低的Ct值），表明ASFV污染水平较高（高CN值）。与生产ASFV污染的饲料后立即采集的样本相比，在其后生产第三批饲料后采集的样本检测到的ASFV较少（Ct值较大），表明在随后重复的饲料生产过程中ASFV污染水平较低（CN值较低）。
综上所述，一旦ASFV被实验引入饲料生产环境，病毒就在整个工厂广泛分布，随着后续批次饲料的生产，检出率只有微小变化。
来源：Elijah CG, Trujillo JD, Jones CK, Gaudreault NN, Stark CR, Cool KR, Paulk CB, Kwon T, Woodworth JC, Morozov I, Gebhardt JT, Richt JA. Evaluating the Distribution of African Swine Fever Virus Within a Feed Mill Environment Following Manufacture of Inoculated Feed. Kansas Agricultural Experiment Station Research Reports. 2020; 6(10). https://doi.org/10.4148/2378-5977.8012
