目前还没有预防非洲猪瘟病毒的疫苗,疫情控制通常依赖于对受感染或暴露动物进行隔离和清除。到目前为止,要有效检测活的非洲猪瘟病毒(ASFV),每次诊断测试都需要从活体猪上收集血细胞。本文,我们报告了一种检测活ASFV的新方法,该方法可最大程度地减少对活体动物样本的需求,并使兽医实验室更容易对该病毒进行诊断。
本文,我们确定了MA-104细胞可以用来检测感染性ASFV的存在,其敏感性比原代猪巨噬细胞低1个对数,但比rt-PCR的灵敏度高约1个对数。MA-104是一种商品化的细胞株,从黑长尾猴肾上皮细胞中分离出来,通常用于PRRS诊断和猴轮状病毒生产。MA-104细胞的倍增时间为72小时,不需要任何特殊的培养基,且易于冷冻,这是在爆发情况下需要处理大量临床样本以确定其是否含有传染性ASFV病毒或仅仅是ASFV DNA时所必需的。此外,MA-104细胞形成清晰的血液吸附(HA)的能力将有助于ASFV的快速诊断。在没有红血球来源的情况下,可以使用抗ASFV抗体对MA-104细胞进行明显的ASFV染色,这对于确认ASF在一些可能由于CD2突变而不会形成HA的天然分离物中的存在。这种对ASFV感染细胞的清晰染色比用猪巨噬细胞作为底物具有优势,因为猪巨噬细胞具有过氧化物酶活性,导致未感染细胞的高背景,增加了漏检阳性结果或证实假阳性结果的可能性。
初步研究表明,我们能够从受感染的血液样本中分离出ASFV,这表明MA-104也是从现场样本中直接分离的良好底物。
来源:Rai A, Pruitt S, Ramirez-Medina E, Vuono EA, Silva E, Velazquez-Salinas L, Carrillo C, Borca MV, Gladue DP. Identification of a Continuously Stable and Commercially Available Cell Line for the Identification of Infectious African Swine Fever Virus in Clinical Samples. Viruses. 2020; 12(8): 820. https://doi.org/10.3390/v12080820