病毒中和试验(VNT)被广泛应用于猪瘟血清学调查和猪瘟疫苗效果评估。然而,病毒中和试验是一个耗时的过程,需要进行细胞培养和活病毒接毒。C株经典猪瘟疫苗是目前用于经典猪瘟控制和预防的最常用的疫苗。在这项研究中,我们提出了一种基于中和单克隆抗体(mAb)的竞争性酶联免疫吸附试验(cELISA),重点是替代病毒中和试验进行C株疫苗接种后监测。
制备了一株对C株具有较强中和活性的单克隆抗体(6B211)。基于6B211能与猪血清中C株诱导的中和抗体竞争结合捕获抗原C株E2的策略,建立并优化了一种新的cELISA。检测C株病毒中和试验阴性猪血清(n = 445)和C株病毒中和试验阳性猪血清(n = 70),基于6B211的cELISA显示出100%的敏感性(95%可信区间:94.87-100%)和100%的特异性(95%可信区间:100-100%)。用cELISA方法,最早可在接种后7天在猪体内检测到C株抗体。通过平行测试猪血清(n = 139),cELISA与VNT显示出极好的一致性(kappa = 0.957)。cELISA中血清样品的抑制率与其在VNT中的滴度高度相关(r2 = 0.903,p <0.001)。另外,cELISA的内部和内部检测均显示出可接受的重复性,且变异系数(CV)低。
这种新的cELISA与VNT有很好的一致性和高度相关性。它是一种快速、简便、安全、经济的检测方法,可用于猪群水平的疫苗免疫反应监测,是C株疫苗接种后血清监测的可靠工具。
来源: Wang, L., Mi, S., Madera, R. et al. A neutralizing monoclonal antibody-based competitive ELISA for classical swine fever C-strain post–vaccination monitoring. BMC Vet Res 16, 14 (2020). https://doi.org/10.1186/s12917-020-2237-6