本研究旨在通过蛋白质组学法确定公猪精液耐冻性的精子膜蛋白标记。 来自14头成年公猪的精液经过缓慢冷冻和快速解冻。解冻后,分析精子活力和运动性,并根据结果,将公猪分成两组:耐冻性良好(GFE)和较差(PFE)。提取精子膜蛋白并进行双向电泳。通过计算机化资源分析染色凝胶以指示差异表达的蛋白质斑点,并通过质谱法鉴定。
6头公猪表现出良好的耐冻性,平均精子活力和运动性分别为2.2±0.8和41.8±22.9,而8头公猪则表现出较差的耐冻性,平均精子活力和运动性分别为1.9±0.6和26.8±17.5。检测到每个凝胶平均263±62.2个斑点,且所有凝胶中始终存在234.2±54.6个斑点。各组间五个点的强度显着不同。PFE组中IgG结合蛋白和乳粘素的Fc片段更强,而芳基硫酸酯酶A和纤维状肌动蛋白的加帽蛋白亚基α1在GEF组中表达更多。耐冻性差的公猪精子膜中IgG的Fc片段较高,精子凝集且活动性降低。乳凝集素在耐冻性差的公猪精子膜中较高,可能导致配子氧化应激。芳基硫酸酯酶A在良好的耐冻性公猪的精子膜中较高,在解冻后的能量代谢中发挥作用。纤维肌动蛋白加帽α1在良好的耐冻性公猪的精子中更高,与精子尾部的肌动蛋白丝结合。
基于它们的功能和与其它蛋白质的相互作用,我们得出结论,这4种精子膜蛋白可能作为公猪精液耐冻性的潜在标志物。
Daianny B.Guimarães, Tatyane B.Barros, Maurício F.van Tilburg, Jorge A.M.Martins, Arlindo A.Moura, Frederico B.Moreno, Ana C.Monteiro-Moreira, Renato A.Moreira, RicardoToniolli. Sperm membrane proteins associated with the boar semen cryopreservation. Animal Reproduction Science. Volume 183, August 2017, Pages 27-38. https://doi.org/10.1016/j.anireprosci.2017.06.005