在奥地利东南部的施蒂里亚州,一家小规模母猪场称该公司于去年1月份起出现了由仔猪先天性震颤造成的重大仔猪损失。对该猪场的动物进行了检查并采样。受先天性震颤影响的仔猪表现出严重的横向震动,常常不能吸吮母乳,导致断奶前死亡率升高。受影响的窝次,先天性震颤的患病率从的患病率为20%-100%不等。进行病理检查,证实了典型先天性震颤A-II型损伤的存在。
通过基于非典型猪瘟病毒(APPV)特异性TaqMan探针的逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),对猪场的各种样本进行了测试,但结果均为阴性。 然而我们通过使用新型潘瘟病毒 RT-PCR(PPF 5'-GTKATHCAATACCCTGARGC-3'和PPR 5'-GGRTTCCAGGARTACATCA-3')从先天性震颤的仔猪的血清样本获得了适当长度的扩增子,其检测到了经典猪瘟病毒,牛病毒性腹泻病毒-1,牛病毒性腹泻病毒-2,博尔纳病病毒,猴B病毒和非典型瘟病毒。令人惊讶的是,该RT-PCR的测序发现了具有不间断开放阅读框的未知序列。初步的基本局部比对搜索结果为“未发现显着相似序列”,但270aa的翻译序列与不同的瘟病毒一致。在受先天性震颤影响的仔猪及其同窝仔猪的所有样本(血清,扁桃体,肺,肝,脾和中枢神经系统)中均检测到病毒RNA。
用受影响的仔猪血清样品接种SK-6细胞后,用RT-PCR检测到该未知瘟病毒的扩增。我们将其临时命名为“Linda”(侧向诱导神经变性剂),以避免与其他瘟病毒混淆。我们确定了Linda病毒(LV)的全基因组,并确定了LV基因组的长度。 我们进行了LV的系统发育分析,显示LV与其他瘟病毒的遗传分化。我们发现LV,被认可的瘟病毒和非典型瘟病毒之间的一致性只有60%,但LV和猴B病毒之间的一致性是68%。比较LV和猴B病毒的瘟病毒多蛋白序列,其氨基酸一致性为69%,且与所有其他瘟病毒的氨基酸一致性为<54%。
结论
在奥地利猪场的受先天性震颤影响的仔猪中发现了一种未知的瘟病毒。我们在脊髓的整个白质中观察到严重髓鞘形成减少,且在受先天性震颤影响的仔猪的脑中检测到的瘟病毒抗原,表明感染和病变之间有因果关系。组装基因组的分析可明确瘟病毒属中Linda病毒就关于瘟病毒特异病毒的瘟病毒特异性基因(Npro和Erns)的存在以及与其他瘟病毒的序列同源性。与几乎不感染培养细胞的非典型猪瘟病毒(APPV)相反,Linda病毒易在猪细胞系上繁殖而不需要适应,类似于猴B病毒。 我们认为Linda病毒可能与猴B病毒来源相同。
在发现猴B病毒的10年间,猴B病毒在全球范围内得到了广泛的关注,但在澳大利亚境外从未发现过该病毒。 猴B病毒的广泛细胞培养向性导致了最近关于病毒从一个物种传播到猪宿主的假说。在不同大陆的猪中发现具有显着序列分歧的相关瘟病毒表明两种病毒均可能具有猪源性。 交叉反应E2特异性单克隆抗体6A5的鉴定表明存在与相关瘟病毒蛋白的交叉反应性,这可能干扰经典猪瘟病毒的血清学检测。需要进一步的研究来调查Linda病毒在欧洲的流行率和流行病学,并评估其在受控动物实验中的毒力。
Lamp B, Schwarz L, Högler S, Riedel C, Sinn L, Rebel-Bauder B, et al. Novel Pestivirus Species in Pigs, Austria, 2015. Emerg Infect Dis. 2017;23(7):1176-1179. https://dx.doi.org/10.3201/eid2307.170163