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快速检测猪肉中刚地弓形虫的环介导等温扩增技术的建立

本实验建立的环介导等温扩增技术可为检测刚地弓形虫基因DNA提供一种简单,特异,敏感和快速的方法,故期望其在多种食品监测刚地弓形虫污染中起到重要作用。

14 4月 2017
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环介导等温扩增技术(LAMP)是一种新兴的快速扩增DNA的方法,且在等温的条件下具有高特异性和高敏感性。本实验我们使用针对刚地弓形虫的高度保守区域 ITS-1序列的6种引物建立了环介导等温扩增技术。在等温的条件下(65 °C水浴)可在30分钟内完成扩增程序,特异性实验证实与犬新孢子虫,柔嫩艾美耳球虫,隐孢子虫,李斯特菌和猪链球菌 DNA模板间没有交叉反应性。LAMP的检测极限为0.9飞克刚地弓形虫基因DNA,其敏感性是传统PCR实验的10倍。使用LAMP和传统PCR实验检测来自中国浙江的118份猪场样本的刚地弓形虫DNA。结果表明LAMP的敏感性远高于传统的PCR (13.56% 和 9.32%)

Xunhui Zhuo, Bin Huang, Jiaqing Luo, Haijie Yu, Baolong Yan, Yi Yang, Aifang Du. Development and application of loop-mediated isothermal amplification assays based on ITS-1 for rapid detection of Toxoplasma gondii in pork.

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